医学·药学
杨瑞瑞, 王浩, 陆恒, 李海燕, 王同玲, 张丽媛, 郭恒, 丁玉松
目的 探讨自噬诱导剂能否通过激活自噬减少高糖高脂诱导的小鼠胰岛β细胞铁死亡。方法 选取小鼠胰岛瘤MIN6细胞,通过25 mmol·L-1高糖联合200 μmol·L-1棕榈酸钠(high Glucose and high Sodium Palmitate,GP)干预,建立胰岛β细胞损伤模型,在此基础上给予雷帕霉素(rapamycin,RAPA)及铁死亡诱导剂(erastin,Era)干预24 h后,用CCK8检测细胞活力;用试剂盒检测细胞亚铁离子、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione Peroxidase 4,GPX4)和酰基辅酶A 合成酶长链家族成员4 (acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)、铁蛋白(Ferritin,FE)及自噬相关蛋白微管相关蛋白l轻链3Ⅱ(Microtubule—associated protein1 light chain3,LC3Ⅱ)、P62水平。结果 与对照组相比,GP组及Era组MIN6细胞活力、GSH含量、SOD活力均降低,ROS、MDA及亚铁离子增多,GPX4蛋白表达水平降低,ACSL4、LC3Ⅱ、P62、FE蛋白表达升高(P<0.05)。与GP相比,RAPA干预后细胞活力增加,RAPA使亚铁离子、MDA及ROS水平降低,GSH、SOD含量、GPX4、LC3Ⅱ蛋白表达水平升高,ACSL4、P62、FE蛋白表达降低(P<0.05)。结论 铁死亡参与GP诱导的MIN6细胞损伤,其机制可能与自噬流阻滞有关。雷帕霉素可改善β细胞铁死亡。