医学·药学
徐浩 , 钱彪 , 杨立 , 张思源 , 沈志远 , 邵润芃 , 王勤章
目的 探究豚鼠糖尿病膀胱病(DCP)在经尿道灌注干细胞白血病(SCL)基因重组慢病毒后所引 发 的 Cajal 样
间质细胞(ICC)电位活动的改变。方法 购买健康雄性豚鼠 90 只,按照 200 mg/kg 单次腹腔注射 1%的链脲佐菌素
(STZ),正常喂养 12 周后,筛选出符合 DCP 模型标准的的豚鼠并将其随机分为 3 组:实验组、阳性对照组、空白对
照组。实验组经尿道灌注 0.2 mL 滴度为 2×107
IU 的 SCL 基因重组慢病毒,阳性对照组经尿道灌注 0.2 mL空慢病
毒,空白对照组经尿道灌注 0.2 mL PBS 液。每组在转染后 2、7、14、28 d 这 4 个时间节点每次处死 3 只豚鼠,迅速
摘取膀胱,选择胶原酶 V 消融法分离提取初代 ICC 并继续培养。72 h 后运用膜片钳技术检测 ICC 自发及 ATP 诱发
电位活动。结果 体外通过胶原酶消融法可分离培养 DCP 豚鼠膀胱中 ICC,运用细胞膜片钳技术观察到在无刺激条
件下检测不到 ICC 的内向电流,而在 ATP(100 μmol/L)条件 激发下可检测到 ICC 的内向电流。实验组 2 d 时与其
他两组内向电流无明显变化,实验组 SCL 慢病毒转染 DCP 膀胱 7、14、28 d 时可检测到 ICC 内向电流比其他两组
高(P<0.05),14 d 达到峰值 350.0±29.9pA,随后降低。阳性对照组与空白对照组随着 DCP 膀胱持续受损,内向电
流逐步降低(P<0.05)。结论 SCL 基因重组慢病毒经尿道灌注可成功转染豚鼠 DCP 膀胱,使受损的膀胱 ICC 电流
幅度逐步增高,说明 SCL 基因对 DCP 膀胱中受损 ICC 功能有部分改善作用。