畜牧·兽医
郭玉强 , 程波 , 宁孟影 , 贾斌 , 杜军 , 戚帅 , 刘帅兵 , 王绪海 , 张永生 , 韩国华
2014, 32(5): 550-554.
为了研究 Zfx 基因在精子发生过程中的作用,本实验利用 RNA 干扰技术针对猪 Zfx 基因 mRNA 的不同靶位设
计构建了 4 个不同的 shRNA 干扰载体:3 个 RNAi-Ready-pSIREN-RetroQ-ZsGreen(pSIREN)质粒重组载体(a、b、c),1
个 pLL3.7 慢病毒骨架质粒重组载体(pLL3.7-shRNA)。通过对仔猪睾丸体外培养生精细胞中的 Zfx 基因进行人为干
扰后,提取总 mRNA,利用 qRT-PCR 对 Zfx 基因 mRNA 表达进行丰度测定。结果表明:pSIREN 质粒重组载体干扰组
对 Zfx 基因没有明显地作用,慢病毒骨架质粒重组载体干扰组对 Zfx 基因表达抑制效果显著,抑制率为 51%(P﹤
0.05)。结论:筛选获得了慢病毒骨架质粒重组干扰载体,其对仔猪睾丸体外培养生精细胞中的 Zfx 基因表达具有显
著地干扰作用。